Agarose Gel Electrophoresis جي بنيادي ٽيڪنالاجي (1)

1. درجه بندي

جيل الیکٹروفورسس عمودي قسمن ۾ ورهايل آهي (بشمول ڪالمن جيل ۽ سليب جيل) ۽ افقي قسمن (بنيادي طور تي سليب جيل) (شڪل 6-18). عام طور تي، عمودي علحدگي افقي کان ٿورو بهتر آهي، پر افقي جيل جي تياري ۾ گهٽ ۾ گهٽ چار فائدا آهن: سڄي جيل جي هيٺان حمايت آهي، گهٽ ڪنسنٽريشن ايگرز جي استعمال جي اجازت ڏئي ٿي؛ اهو ممڪن آهي ته مختلف وضاحتن جي agarose gel پليٽ تيار ڪرڻ؛ جيل تيار ڪرڻ ۽ نموني لوڊ ڪرڻ وڌيڪ آسان آهن؛ electrophoresis چيمبر تعمير ڪرڻ آسان ۽ قيمتي اثرائتي آهي. جيئن ته افقي الیکٹروفورسس ايگرز جيل پليٽ سان ڪيو ويندو آهي مڪمل طور تي اليڪٽرروفورسس بفر جي مٿاڇري کان اٽڪل 1 ملي ميٽر هيٺ، ان کي پڻ زير زمين اليڪٽرروفورسس سڏيو ويندو آهي.

图片2

Electrophoresis ٽينڪ DYCP-31DN agarose gel electrophoresis لاء

2. بفر سسٽم

نيوڪليڪ ايسڊ جي علحدگيء ۾، اڪثر سسٽم مسلسل سسٽم کي اپنائڻ ڪندا آهن. عام طور تي استعمال ٿيندڙ الیکٹروفورسس بفرز ۾ شامل آهن TBE (0.08mol/L Tris·HCl، pH 8.5، 0.08mol/L بورڪ ايسڊ، 0.0024mol/L EDTA) بفر ۽ THE (0.04mol/L Tris·HCl، pH 7.8, 0.02mol/ سوڊيم ايڪٽيٽ، 0.0018mol/L EDTA) بفر. اهي بفر عام طور تي 10x اسٽاڪ حل جي طور تي تيار ڪيا ويندا آهن ۽ استعمال ۾ گهربل ڪنسنٽريشن تائين ملائي ويندا آهن. agarose gel ۾ لڪير ۽ سرڪلر ڊي اين اي جي لڏپلاڻ جي شرح استعمال ٿيل بفر سان مختلف آهن. بفر ۾، لڪير ڊي اين اي جي لڏپلاڻ جي شرح گول ڊي اين اي جي ڀيٽ ۾ وڌيڪ آهي، جڏهن ته TBE بفر ۾، سامهون صحيح آهي.

3

3. Agarose جيل جي تياري

(1) Horizontal Agarose Gel جي تياري

(a) 1x electrophoresis بفر استعمال ڪندي agarose gel جي گهربل ڪنسنٽريشن تيار ڪريو.

(b) ايگرز کي گرم ڪرڻ لاءِ يا ته اُبلندڙ پاڻيءَ جي غسل ۾، مقناطيسي اسٽيرر تي، يا مائيڪرو ويو ۾ مڪمل پگھلڻ لاءِ. ايگرز محلول کي 55°C تي ٿڌو ڪيو ۽ 0.5 μg/ml جي آخري ڪنسنٽريشن تي ايٿيڊيم برومائيڊ (EB) رنگ شامل ڪريو.

(c) شيشي جي ڪنارن کي يا ايڪريل پليٽن جي ڪنارن کي ٿوري مقدار ۾ ايگرز جيل سان بند ڪريو، ڪنگڻ شامل ڪريو، ۽ ڪنگھي ڏندن کي پليٽ جي مٿان 0.5 ~ 1.0 ملي ميٽر رکي.

(d) گليل ايگرز جيل جي حل کي لڳاتار گلاس يا ايڪريل پليٽ مولڊ ۾ وجھو (ٿلهي جو دارومدار DNA نموني جي مقدار تي هوندو آهي)، هوا جي بلبلن جي اچڻ کان پاسو ڪندي. ان کي قدرتي طور تي ڪمري جي حرارت تي مضبوط ڪرڻ ڏيو.

(e) مڪمل پختگي کان پوء احتياط سان ڪنگ کي هٽايو. جيل ٽينڪ تي اليڪٽرروفورسس بفر جي مناسب مقدار شامل ڪريو، يقيني بڻائين ته جيل پليٽ اليڪٽرروفورسس بفر جي مٿاڇري کان اٽڪل 1 ملي ميٽر هيٺ دٻيل آهي.

(2) عمودي Agarose جيل جي تياري

(a) ايٿانول سان ڌوئڻ سان شيشي جي پليٽن مان گريس يا رهجي وڃڻ.

(b) اسپيسر پليٽن کي اڳيان ۽ پوئتي ڊيمن جي وچ ۾ رکو، اسپيسر پليٽن جي ڪنارن کي اڳيان ۽ پوئتي ڊيمن سان ترتيب ڏيو، ۽ انھن کي ڪليمپ سان محفوظ ڪريو.

(c) اسپيسر پليٽن جي ڪنارن جي وچ ۾ 1x بفر ۾ 2% اگروز شامل ڪريو ته جيئن جيل ڪاسٽنگ چيمبر جي تري ۾ 1 سينٽي اوچو ايگرز پلگ ٺاهيو وڃي.

(d) 1x بفر ۾ تيار ڪيل، 1x بفر ۾، مٿي کان هيٺان 1 سينٽي تائين جيل چيمبر ۾ پگھليل ايگرز جيل کي گهربل ڪنسنٽريشن تي اڇو.

(e) ڪنگھي داخل ڪريو، ڪنگھي ڏندن جي ھيٺان ھوائي بلبلن کي ڦاسائڻ کان پاسو ڪريو. ڪڏهن ڪڏهن، ايگرز جيل کولنگ دوران ڪنگڻ واري ڏند تي جھرڻ ظاهر ٿي سگھن ٿا؛ اهڙين حالتن ۾، صرف ان کي مضبوط ڪرڻ لاء مٿي تي ڪجهه ڳريل اگروز شامل ڪريو.

(f) ڪنگھي کي هٽايو. لوڊشيڊنگ جي سلاٽ ۾ بفر ليڪيج کي روڪڻ لاءِ، ايگرز جيل پليٽ ۽ اليڪٽرروفورسس چيمبر جي وچ ۾ ڪنيڪشن کي 2٪ اگروز سان سيل ڪريو ۽ بفر جي گهربل مقدار شامل ڪريو.

(g) جيل چيمبر ۾ 1x الیکٹروفورسس بفر شامل ڪريو.

(h) احتياط سان ڊي اين اي نمونن کي بفر جي هيٺان ايگرز جيل تي لوڊ ڪريو.

3

agarose gel electrophoresis بابت بنيادي ڄاڻ بابت وڌيڪ معلومات، اسان ايندڙ هفتي شيئر ڪنداسين. ڪاش اهي معلومات توهان جي تجربي لاءِ مددگار ثابت ٿين.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) اسان جي پنهنجي پروفيشنل ٽيڪنيڪل ٽيم ۽ آر اينڊ ڊي سينٽر سان گڏ 50 سالن کان وڌيڪ عرصي تائين اليڪٽرروفورسس آلات ٺاهڻ ۾ ماهر آهي. اسان وٽ قابل اعتماد ۽ مڪمل پيداوار واري لائن ڊيزائن کان معائنو، ۽ گودام، انهي سان گڏ مارڪيٽنگ سپورٽ آهي. اسان جا مکيه پراڊڪٽس Electrophoresis Cell (ٽينڪ/چيمبر)، Electrophoresis Power Supply، Blue LED Transilluminator، UV Transilluminator، جيل تصويري ۽ تجزياتي نظام وغيره آهن.

اسان ھاڻي ڀائيوارن کي ڳولي رھيا آھيون، ٻئي OEM اليڪٽرروفورس ٽينڪ ۽ تقسيم ڪندڙ ڀليڪار آھن.

جيڪڏهن توهان وٽ اسان جي شين جي خريداري جو منصوبو آهي، مهرباني ڪري اسان سان رابطو ڪرڻ ۾ سنکوڪ نه ڪريو. توهان اسان کي اي ميل تي پيغام موڪلي سگهو ٿا[اي ميل محفوظ]يا[اي ميل محفوظ]، يا مهرباني ڪري اسان کي +86 15810650221 تي ڪال ڪريو يا Whatsapp + 86 15810650221 شامل ڪريو، يا Wechat: 15810650221.

Whatsapp يا WeChat تي شامل ڪرڻ لاءِ مهرباني ڪري QR ڪوڊ اسڪين ڪريو.

2


پوسٽ ٽائيم: ڊسمبر-07-2023