Agarose Gel Electrophoresis جي بنيادي ٽيڪنالاجي (2)

نموني تيار ڪرڻ ۽لوڊشيڊنگ

اڪثر ڪيسن ۾ اسٽيڪنگ جيل جي بغير مسلسل بفر سسٽم جي استعمال جي ڪري، نموني کي مناسب ڪنسنٽريشن ۽ ننڍڙو حجم هجڻ گهرجي. استعمال ڪريو aپائپيٽسست نموني شامل ڪرڻ لاء، 5-10 μg في چڱي سان، قرارداد ۾ وڏي گهٽتائي کان بچڻ لاء. جڏهنلوڊ ڪرڻ جو نمونو، بجلي جي فراهمي کي بند ڪيو وڃي. نموني ۾ انڊيڪيٽر ڊائي (0.025% بروموفينول نيرو يا نارنگي) ۽ سڪروز (10-15%) يا گليسرول (5-10%) هجڻ گهرجي ته جيئن ان جي کثافت کي وڌايو وڃي، نموني کي مرڪوز ڪري، ۽ ڦهلائڻ کي روڪيو وڃي. تنهن هوندي به، ڪڏهن ڪڏهن sucrose يا glycerol الیکٹروفورسس جي نتيجن ۾ U-shaped bands جو سبب بڻجي سگهي ٿو، جنهن کي 2.5٪ Ficoll (polyvinylpyrrolidone) استعمال ڪرڻ کان بچائي سگهجي ٿو.

1

Electrophoresis

electrophoresis لاء وولٹیج 5-15 V/cm آهي، عام طور تي 10 V/cm جي چوڌاري. وڏي ماليڪيولن جي الڳ ٿيڻ لاءِ، وولٽيج گھٽ هجڻ گھرجي، عام طور تي 5 V/cm کان وڌيڪ نه ھجي.

2

داغ لڳائڻ

فلورسنٽ ڊائي ايٿيڊيم برومائيڊ (اي بي) عام طور تي ايگرز جيل ۾ ڊي اين اي بينڊ کي ڏسڻ لاءِ داغ لاءِ استعمال ڪيو ويندو آهي. EB DNA ماليڪيولز جي بنيادي جوڙن جي وچ ۾ داخل ڪري سگھي ٿو، جنهن ڪري EB DNA سان جڙيل آهي. DNA ذريعي 260 nm الٽرا وائلٽ روشني جي جذب کي EB ڏانهن منتقل ڪيو ويندو آهي، ۽ پابند EB 590 nm تي fluorescence خارج ڪري ٿو ڳاڙهي-نارنگي علائقي ۾ نظر ايندڙ روشني اسپيڪٽرم. جيل کي 1 mmol/L MgSO4 محلول ۾ 1 ڪلاڪ لاءِ داغ ڏيڻ سان انبائونڊ EB جي ڪري پس منظر جي فلورسنس کي گھٽائي سگھي ٿو، جيڪا ڊي اين اي جي ننڍي مقدار جي سڃاڻپ کي آسان بڻائي ٿي.

EB رنگ جا ڪيترائي فائدا آهن: اهو استعمال ڪرڻ آسان آهي، نيوڪليڪ ايسڊز کي ٽوڙي نٿو سگهي، اعلي حساسيت آهي، ۽ ڊي اين اي ۽ آر اين اي ٻنهي کي داغ ڪري سگهي ٿو. EB نموني ۾ شامل ڪري سگھجي ٿو ۽ ڪنهن به وقت UV جذب استعمال ڪندي ٽريڪ ڪري سگھجي ٿو. staining کان پوء، EB کي ختم ڪري سگهجي ٿو n-butanol سان extracting.

بهرحال، EB رنگ هڪ طاقتور ميوٽاجن آهي، ۽ احتياطي تدبيرون، جهڙوڪ پوليٿيلين دستانا پائڻ، هٿ ڪرڻ دوران وٺڻ گهرجن. Acridine نارنگي پڻ هڪ عام استعمال ٿيل رنگ آهي، ڇاڪاڻ ته اهو هڪ واحد-اسٽريٽڊ ۽ ڊبل-اسٽرينڊ نيوڪليڪ ايسڊز (DNA، RNA) جي وچ ۾ فرق ڪري سگهي ٿو. اهو ڏيکاري ٿو سائي fluorescence (530 nm) ٻٽي-stranded nucleic acids لاء ۽ red fluorescence (640 nm) واحد-stranded nucleic acids لاء. اضافي طور تي، ٻين رنگن جهڙوڪ ميٿيلين نيرو، ميٿيلين سائو، ۽ ڪوئنولين بي استعمال ڪري سگھجن ٿيون.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) اسان جي پنهنجي پروفيشنل ٽيڪنيڪل ٽيم ۽ آر اينڊ ڊي سينٽر سان گڏ 50 سالن کان وڌيڪ عرصي تائين اليڪٽرروفورسس آلات ٺاهڻ ۾ ماهر آهي. اسان وٽ قابل اعتماد ۽ مڪمل پيداوار واري لائن ڊيزائن کان معائنو، ۽ گودام، انهي سان گڏ مارڪيٽنگ سپورٽ آهي. اسان جا مکيه پراڊڪٽس Electrophoresis Cell (ٽينڪ/چيمبر)، Electrophoresis Power Supply، Blue LED Transilluminator، UV Transilluminator، جيل تصويري ۽ تجزياتي نظام وغيره آهن.

3

اسان ھاڻي ڀائيوارن کي ڳولي رھيا آھيون، ٻئي OEM اليڪٽرروفورس ٽينڪ ۽ تقسيم ڪندڙ ڀليڪار آھن.

جيڪڏهن توهان وٽ اسان جي شين جي خريداري جو منصوبو آهي، مهرباني ڪري اسان سان رابطو ڪرڻ ۾ سنکوڪ نه ڪريو. توهان اسان کي اي ميل تي پيغام موڪلي سگهو ٿا[اي ميل محفوظ]يا[اي ميل محفوظ]، يا مهرباني ڪري اسان کي +86 15810650221 تي ڪال ڪريو يا Whatsapp + 86 15810650221 شامل ڪريو، يا Wechat: 15810650221.

Whatsapp يا WeChat تي شامل ڪرڻ لاءِ مهرباني ڪري QR ڪوڊ اسڪين ڪريو.

2


پوسٽ جو وقت: ڊسمبر-20-2023