polyacrylamide gel electrophoresis ڇا آهي؟

Polyacrylamide Gel Electrophoresis

جيل الیکٹروفورسس هڪ بنيادي ٽيڪنڪ آهي ليبارٽريز ۾ حياتياتي شعبن ۾، ميڪروموليڪولس جي الڳ ٿيڻ جي اجازت ڏئي ٿي جهڙوڪ ڊي اين اي، آر اين اي ۽ پروٽين. مختلف علحدگيءَ واري ميڊيا ۽ ميکانيزم کي اجازت ڏين ٿا ته انهن ماليڪيولن جي ذيلي سيٽن کي انهن جي جسماني خاصيتن جي استحصال سان وڌيڪ اثرائتي نموني جدا ڪيو وڃي. خاص طور تي پروٽين لاء، polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) اڪثر ڪري پسند جي ٽيڪنڪ آهي.

1

PAGE هڪ ٽيڪنڪ آهي جيڪا ميڪروموليڪيولس کي الڳ ڪري ٿي جهڙوڪ پروٽينن کي انهن جي اليڪٽرروفوريٽڪ موبلٽي جي بنياد تي، يعني تجزيي جي صلاحيت مخالف چارج جي اليڪٽرروڊ ڏانهن منتقل ڪرڻ جي صلاحيت. PAGE ۾، اهو طئي ڪيو ويندو آهي چارج، سائيز (ماليڪيولر وزن) ۽ انو جي شڪل. تجزييات پوليڪريلامائيڊ جيل ۾ ٺهيل سوراخن ذريعي هلن ٿيون. ڊي اين اي ۽ آر اين اي جي برعڪس، پروٽين شامل ٿيل امينو اسيد جي مطابق چارج ۾ مختلف آهن، جيڪي اثر انداز ڪري سگهن ٿا ته اهي ڪيئن هلن ٿا. امينو اسيد جون تارون به ثانوي اڏاوتون ٺاهي سگھن ٿيون جيڪي انهن جي ظاهري سائيز تي اثرانداز ٿين ٿيون ۽ ان جي نتيجي ۾ اهي سوراخن مان ڪيئن منتقل ٿي سگهن ٿيون. تنهن ڪري اهو ٿي سگهي ٿو ته ڪڏهن ڪڏهن ضروري هجي ته پروٽينن کي اليڪٽروفورسس کان اڳ رد ڪري انهن کي لڪيرايو وڃي جيڪڏهن سائيز جو وڌيڪ صحيح اندازو گهربل هجي.

ايس ڊي ايس پيج

Sodium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis هڪ ٽيڪنڪ آهي جيڪا 5 کان 250 kDa جي ماس جي پروٽين جي ماليڪيول کي الڳ ڪرڻ لاءِ استعمال ڪئي ويندي آهي. پروٽين صرف انهن جي ماليڪيولر وزن جي بنياد تي الڳ ڪيا ويا آهن. سوڊيم ڊوڊيڪل سلفيٽ، هڪ انوئنڪ سرفڪٽنٽ، جيل جي تياري ۾ شامل ڪيو ويو آهي، جيڪي پروٽين جي نمونن جي اندروني چارجز کي ڇڪيندا آهن ۽ انهن کي ماس تناسب جي برابر چارج ڏئي ٿو. سادي لفظن ۾، اهو پروٽينن کي رد ڪري ٿو ۽ انهن کي منفي چارج ڏئي ٿو.

2

اصلي پيج

اصلي پيج هڪ ٽيڪنڪ آهي جيڪا پروٽينن جي جداگي لاءِ غير رد ٿيل جيل استعمال ڪندي آهي. ايس ڊي ايس پيج جي برعڪس، جيل جي تياري ۾ ڪو به رد ڪرڻ وارو ايجنٽ شامل نه ڪيو ويو آهي. نتيجي طور، پروٽينن جي جدائي پروٽين جي چارج ۽ سائيز جي بنياد تي ٿيندي آهي. هن ٽيڪنڪ ۾، پروٽين جي ٺهڻ، فولڊنگ ۽ امينو ايسڊ زنجيرن جا عنصر آهن جن تي علحدگي منحصر آهي. ھن عمل ۾ پروٽين کي نقصان نه پھچندو آھي، ۽ الڳ ٿيڻ کان پوءِ بحال ٿي سگھن ٿا.

3

polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ڪيئن ڪم ڪندو آهي؟

PAGE جو بنيادي اصول اهو آهي ته اليڪٽرڪ ڪرنٽ کي استعمال ڪندي پوليڪريلامائيڊ جيل جي سوراخن مان گذرڻ ذريعي تجزين کي الڳ ڪرڻ. هن کي حاصل ڪرڻ لاءِ، هڪ اڪريلامائيڊ-بيسڪريلامائيڊ ملايو پوليمرائز (polyacrylamide) امونيم پرسلفيٽ (APS) جي اضافي سان ڪيو ويندو آهي. اهو رد عمل، جيڪو tetramethylethylenediamine (TEMED) ذريعي پکڙيل آهي، هڪ خال جهڙو ڍانچو ٺاهيندو آهي، جنهن جي ذريعي analytes منتقل ٿي سگهن ٿا (شڪل 2). جيل ۾ شامل ڪل ايڪريلامائيڊ جو جيترو وڌيڪ سيڪڙو هوندو، اوترو ئي ننڍڙو سوراخ جي سائيز هوندي، ان ڪري ننڍيون پروٽين جيڪي ان مان گذرڻ جي قابل هونديون. acrylamide ۽ bisacrylamide جو تناسب پڻ سوراخ جي سائيز تي اثر انداز ڪندو پر اهو اڪثر ڪري مسلسل رکيو ويندو آهي. ننڍڙن پورن جو سائز به ان رفتار کي گھٽائي ٿو جنهن تي ننڍڙا پروٽين جيل ذريعي منتقل ٿي سگھن ٿا، انهن جي ريزوليوشن کي بهتر بڻائي ۽ انهن کي تيزيءَ سان بفر ۾ وڃڻ کان روڪين ٿا جڏهن ڪرنٽ لاڳو ٿئي ٿو.

3-1

Polyacrylamide Gel Electrophoresis لاء سامان

جيل اليڪٽرروفورسس سيل (ٽينڪ / چيمبر)
polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) لاءِ جيل ٽانڪي agarose gel ٽانڪي کان مختلف آهي. Agarose gel ٽينڪ افقي آهي، جڏهن ته PAGE ٽينڪ عمودي آهي. عمودي اليڪٽرروفورسس سيل (ٽينڪ/چيمبر) ذريعي، هڪ ٿلهي جيل (عام طور تي 1.0mm يا 1.5mm) ٻن شيشي جي پليٽن جي وچ ۾ وجھي ويندي آهي ۽ ان کي نصب ڪيو ويندو آهي ته جيئن جيل جو هيٺيون حصو هڪ چيمبر ۾ بفر ۾ ٻڏي وڃي ۽ مٿيون حصو بفر ۾ ٻڏي وڃي. ٻئي ڪمري ۾. جڏهن ڪرنٽ لاڳو ڪيو ويندو آهي، بفر جو هڪ ننڍڙو مقدار جيل ذريعي مٿين چيمبر کان هيٺئين چيمبر ڏانهن لڏپلاڻ ڪري ٿو. مضبوط ڪلمپس سان گڏ يقيني بڻائڻ لاءِ ته اسيمبلي سڌي پوزيشن ۾ رهي ٿي، سامان تيز جيل رن کي آسان بڻائي ٿو ايستائين جو کولنگ سان مختلف بينڊن جي نتيجي ۾.

4

Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) polyacrylamide gel اليڪٽرروفورسس سيلز (ٽينڪ/چيمبرز) جي سائزن جي حد ٺاهي ٿي. ماڊل DYCZ-20C ۽ DYCZ-20G آهن عمودي اليڪٽرروفورسس سيلز (ٽينڪ/چيمبر) ڊي اين اي جي ترتيب جي تجزيي لاءِ. ڪجھ عمودي اليڪٽرروفورسس سيلز (ٽينڪ/چيمبر) بلٽنگ سسٽم سان مطابقت رکن ٿا، جهڙوڪ ماڊل DYCZ-24DN، DYCZ-25D ۽ DYCZ-25E مغربي بلوٽنگ سسٽم ماڊل DYCZ-40D، DYCZ-40G ۽ DYCZ-40F، جيڪي پروٽين جي ماليڪيول کي جيل کان جھلي تائين منتقل ڪرڻ لاءِ استعمال ٿين ٿا. SDS-PAGE electrophoresis کان پوء، مغربي بلوٽنگ هڪ ٽيڪنڪ آهي جيڪو پروٽين جي مرکب ۾ هڪ مخصوص پروٽين کي ڳولڻ لاء. توهان انهن blotting سسٽم کي تجرباتي گهرجن مطابق چونڊي سگهو ٿا.

6

Electrophoresis پاور سپلائي
جيل کي هلائڻ لاءِ بجلي فراهم ڪرڻ لاءِ، توهان کي اليڪٽرروفورسس پاور سپلائي جي ضرورت پوندي. Liuyi بايو ٽيڪنالاجي ۾ اسان سڀني ايپليڪيشنن لاءِ الیکٹروفورسس پاور سپلائيز جو هڪ رينج فراهم ڪندا آهيون. ماڊل DYY-12 ۽ DYY-12C اعلي مستحڪم وولٹیج ۽ موجوده سان گڏ اعلي وولٹیج جي گهرج electrophoresis کي پورا ڪري سگهن ٿا. ان ۾ اسٽينڊ، ٽائيمنگ، وي ايڇ ۽ قدم قدم جي ايپليڪيشن جو ڪم آهي. اهي IEF ۽ DNA جي ترتيب ڏيڻ لاءِ مثالي آهن الیکٹروفورسس ايپليڪيشن. عام پروٽين ۽ ڊي اين اي الیکٹروفورسس ايپليڪيشن لاءِ، اسان وٽ ماڊل DYY-2C، DYY-6C، DYY-10 وغيره آهن، جيڪي پڻ گرم سيلز پاور سپلاءِ آهن جن سان اليڪٽرروفورسس سيلز (ٽينڪ/چيمبرز) آهن. اهي وچولي ۽ گهٽ وولٹیج اليڪٽرروفورسس ايپليڪيشنن لاءِ استعمال ٿي سگهن ٿا، جهڙوڪ اسڪول جي ليبارٽري جي استعمال لاءِ، اسپتال جي ليبارٽري وغيره. وڌيڪ ماڊل پاور سپلاءِ لاءِ، مهرباني ڪري دورو ڪريو اسان جي ويب سائيٽ.

7

Liuyi برانچ چين ۾ 50 سالن کان وڌيڪ تاريخ رکي ٿي ۽ ڪمپني سڄي دنيا ۾ مستحڪم ۽ اعليٰ معيار جون شيون مهيا ڪري سگهي ٿي. سالن جي ترقي ذريعي، اهو توهان جي پسند جي لائق آهي!

اسان جي باري ۾ وڌيڪ معلومات لاء، مهرباني ڪري اسان سان رابطو ڪريو اي ميل ذريعي[اي ميل محفوظ] or [اي ميل محفوظ].

polyacrylamide gel electrophoresis لاء حوالو ڇا آهي؟
1. ڪرين اسٽيوارڊ پي ايڇ ڊي پوليڪريلامائيڊ جيل الیکٹروفورسس، اهو ڪيئن ڪم ڪري ٿو، ٽيڪنڪ جي مختلف قسمن، ۽ ان جون ايپليڪيشنون


پوسٽ جو وقت: مئي-23-2022