Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) ھڪ حساس ۽ تيز ٽيڪنڪ آھي جيڪو بنيادي طور تي ڊي اين اي جي نقصان کي معلوم ڪرڻ ۽ انفرادي سيلن ۾ مرمت ڪرڻ لاءِ استعمال ڪيو ويندو آھي. نالو “Comet Assay” خاص طور تي ڪاميٽ جي شڪل مان آيو آهي جيڪو نتيجن ۾ ظاهر ٿئي ٿو: سيل جو مرڪز "مٿو" ٺاهي ٿو، جڏهن ته خراب ٿيل ڊي اين اي ٽڪرا لڏپلاڻ ڪري ٿو، هڪ "دم" ٺاهي ٿو جيڪو هڪ دومدار وانگر آهي.
اصول
Comet Assay جو اصول برقي ميدان ۾ ڊي اين اي جي ٽڪرن جي لڏپلاڻ تي ٻڌل آهي. برقرار ڊي اين اي سيل نيوڪلئس ۾ رهي ٿو، جڏهن ته خراب ٿيل يا ٽڪرا ٽڪرا ٿيل ڊي اين اي انوڊ ڏانهن لڏپلاڻ ڪري ٿو، جيڪو ڪميٽ جي "دم" ٺاهي ٿو. دم جي ڊيگهه ۽ شدت سڌي طرح ڊي اين اي نقصان جي حد تائين متناسب آهي.
عمل
- سيل جي تياري: جانچڻ لاءِ سيلن کي گھٽ پگھلڻ واري نقطي ايگرز سان ملايو وڃي ٿو ۽ خوردبيني سلائيڊس تي پکڙيل آهي ته جيئن هڪ يونيفارم پرت ٺاهيو وڃي.
- سيل ليسس: سلائڊن کي ليسس محلول ۾ وجھو وڃي ٿو ته جيئن سيل جھلي ۽ ايٽمي جھلي کي ختم ڪري، ڊي اين اي کي بي نقاب ڪري.
- Electrophoresis: سلائڊ الڪالائن يا غير جانبدار حالتن ۾ اليڪٽرروفورسس چيمبر ۾ رکيل آهن. خراب ٿيل ڊي اين اي جا ٽڪرا برقي ميدان جي اثر هيٺ مثبت اليڪٽرروڊ ڏانهن لڏپلاڻ ڪن ٿا.
- داغ لڳائڻ: الیکٹروفورسس کان پوءِ، سلائڊن کي فلورسنٽ رنگ (مثال طور، ايٿيڊيم برومائيڊ) سان داغ ڪيو وڃي ٿو ته جيئن ڊي اين اي کي ڏسڻ ۾ اچي.
- خوردبيني تجزيو: فلورسنس خوردبيني يا خاص سافٽ ويئر استعمال ڪندي، ڪميٽ جي شڪلن جو تجزيو ڪيو ويندو آهي، ۽ پيرا ميٽرز جهڙوڪ دم جي ڊيگهه ۽ شدت ماپي ويندي آهي.
بائيو رينڊر کان تصوير
ڊيٽا جو تجزيو
Comet Assay جا نتيجا ڪيترن ئي اهم پيرا ميٽرن جي بنياد تي جانچيا ويا آهن:
- دم جي ڊگھائي: ڊي اين اي لڏپلاڻ جي فاصلي جي نمائندگي ڪري ٿو، ڊي اين اي نقصان جي حد کي ظاهر ڪري ٿو.
- دم DNA مواد: ڊي اين اي جو سيڪڙو جيڪو دم ۾ لڏپلاڻ ڪري ٿو، اڪثر ڪري ڊي اين اي نقصان جي مقدار جي ماپ طور استعمال ڪيو ويندو آهي.
- زيتون جي دم جو لمحو (OTM): دم جي ڊيگهه ۽ دم ڊي اين اي مواد ٻنهي کي گڏ ڪري ٿو ته ڊي اين اي نقصان جي وڌيڪ جامع ماپ مهيا ڪري.
درخواستون
- جينوٽوڪسيسي اڀياس: Comet Assay وڏي پيماني تي استعمال ڪيو ويندو آهي ڪيميائي، منشيات، ۽ تابڪاري جي سيل ڊي اين اي تي اثر انداز ڪرڻ لاء، ان کي جينوٽڪسيسي ٽيسٽ لاء هڪ اهم اوزار بڻائي ٿو.
- ماحولياتي Toxicology: اهو جاندارن جي ڊي اين اي تي ماحولياتي آلودگي جي اثر جو تجزيو ڪرڻ ۾ مدد ڪري ٿو، ماحولياتي نظام جي حفاظت ۾ بصيرت مهيا ڪري ٿي.
- ميڊيڪل ۽ ڪلينڪل ريسرچ: Comet Assay DNA مرمت جي ميڪانيزم، ڪينسر ۽ ٻين DNA سان لاڳاپيل بيمارين جي مطالعي ۾ استعمال ٿيندو آهي. اهو پڻ سرطان جي علاج جي اثر جو جائزو وٺندو آهي جهڙوڪ ريڊيوٿراپي ۽ ڪيموٿراپي ڊي اين اي تي.
- فوڊ اينڊ ايگريڪلچر سائنسز: جراثيمن جي حفاظت جو جائزو وٺڻ لاء استعمال ڪيو ويو، کاڌي additives، ۽ ٻين مادي، ۽ جانورن جي ماڊل ۾ انهن جي زهر اثرات جي مطالعي لاء.
فائدا
- اعلي حساسيت: ڊي اين اي نقصان جي گھٽ سطح کي ڳولڻ جي قابل.
- سادي آپريشن: ٽيڪنڪ سڌو آهي، ان کي اعلي-throughput اسڪريننگ لاء مناسب بڻائي ٿي.
- وسيع ايپليڪيشن: اهو مختلف سيلن جي قسمن تي لاڳو ٿي سگهي ٿو، بشمول جانورن ۽ ٻوٽن جي سيلن تي.
- مقدار جي چيلنجز: ڊي اين اي جي نقصان تي معيار جي ڊيٽا مهيا ڪرڻ دوران، مقداري تجزيو گهڻو ڪري سافٽ ويئر ۽ تصويري تجزيو ٽيڪنالاجي تي ڀاڙي ٿو.
- تجرباتي حالتون: نتيجن تي اثر انداز ٿي سگھي ٿو عنصر جهڙوڪ اليڪٽرروفورسس ٽائيم ۽ پي ايڇ، تجرباتي حالتن جي محتاط ڪنٽرول جي ضرورت آهي.
حدون
Comet Assay هڪ انمول اوزار آهي بايوميڊيڪل تحقيق، ماحولياتي سائنس، ۽ منشيات جي ترقي ۾ ان جي لچڪ ۽ اعلي حساسيت جي ڪري ڊي اين اي جي نقصان ۽ مرمت کي ڳولڻ ۾. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)پيش ڪري ٿو افقي اليڪٽرروفورسس چيمبر ڪميٽ جي امتحان لاءِ. جي باري ۾ بحث ڪرڻ لاء اسان سان رابطو ڪرڻ لاء ڀلي ڪري آياComet Assayپروٽوڪول
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) اسان جي پنهنجي پروفيشنل ٽيڪنيڪل ٽيم ۽ آر اينڊ ڊي سينٽر سان گڏ 50 سالن کان وڌيڪ عرصي تائين اليڪٽرروفورسس آلات ٺاهڻ ۾ ماهر آهي. اسان وٽ قابل اعتماد ۽ مڪمل پيداوار واري لائن ڊيزائن کان معائنو، ۽ گودام، انهي سان گڏ مارڪيٽنگ سپورٽ آهي. اسان جون مکيه شيون آهن اليڪٽرروفورسس سيل (ٽينڪ/چيمبر)، اليڪٽرروفورسس پاور سپلائي، بليو ايل اي ڊي ٽرانسليوميٽر، يو وي ٽرانسليومينيٽر، جيل اميج ۽ اينالائسز سسٽم وغيره. اسان ليبارٽري لاءِ ليبارٽري آلات جهڙوڪ پي سي آر اوزار، وورٽيڪس ميڪر ۽ سينٽرفيوج پڻ فراهم ڪندا آهيون.
جيڪڏهن توهان وٽ اسان جي شين جي خريداري جو منصوبو آهي، مهرباني ڪري اسان سان رابطو ڪرڻ ۾ سنکوڪ نه ڪريو. توهان اسان کي اي ميل تي پيغام موڪلي سگهو ٿا[اي ميل محفوظ]يا[اي ميل محفوظ]، يا مهرباني ڪري اسان کي +86 15810650221 تي ڪال ڪريو يا Whatsapp + 86 15810650221 شامل ڪريو، يا Wechat: 15810650221.
Whatsapp يا WeChat تي شامل ڪرڻ لاءِ مهرباني ڪري QR ڪوڊ اسڪين ڪريو.
پوسٽ ٽائيم: سيپٽمبر-20-2024