اسان گذريل هفتي ڪيترن ئي خيالن جي حصيداري ڪئي آهي سيلولوز ايڪٽيٽ جھلي الیکٹروفورسس استعمال ڪرڻ لاء، ۽ اسان توهان جي حوالي لاء اڄ هن موضوع کي ختم ڪنداسين.
جي چونڊ بفر ڪنسنٽريشن
سيلولوز ايڪٽيٽ جھلي اليڪٽرروفورسس ۾ استعمال ٿيل بفر ڪنسنٽريشن عام طور تي پيپر اليڪٽرروفورسس ۾ استعمال ٿيندڙ گھٽ آھي.عام طور تي استعمال ٿيل پي ايڇ 8.6Barbital بفر عام طور تي 0.05 mol/L کان 0.09 mol/L جي حد اندر چونڊيو ويندو آهي.جڏهن ڪنسنٽريشن کي چونڊيو، هڪ ابتدائي عزم ڪيو ويندو آهي.مثال طور، جيڪڏهن اليڪٽرروفورسس چيمبر ۾ اليڪٽروڊس جي وچ ۾ جھلي جي پٽي جي ڊيگهه 8-10 سينٽي ميٽر آهي، ته 25V جي وولٽيج جي ضرورت هوندي آهي في سينٽي ميٽر جھلي جي ڊيگهه جي، ۽ موجوده شدت 0.4-0.5 mA في سينٽي ميٽر جي ويڪر ۾ هجڻ گهرجي.جيڪڏهن اهي قدر حاصل نه ڪيا ويا آهن يا اليڪٽرروفورسس جي دوران وڌندا آهن، بفر ڪنسنٽريشن کي وڌايو وڃي يا ختم ڪيو وڃي.
هڪ تمام گھٽ بفر ڪنسنٽريشن جي نتيجي ۾ بينڊ جي تيز حرڪت ۽ بينڊ جي چوٽي ۾ اضافو ٿيندو.ٻئي طرف، هڪ تمام گهڻو وڌيڪ بفر ڪنسنٽريشن بينڊ لڏپلاڻ کي سست ڪري ڇڏيندو، ان کي ڪجهه الڳ ڪرڻ واري بينڊ کي فرق ڪرڻ ڏکيو بڻائيندو.
اهو ياد رکڻ گهرجي ته سيلولوز ايڪٽيٽ جھلي الیکٹروفورسس ۾، ڪرنٽ جو هڪ اهم حصو نموني ذريعي ڪيو ويندو آهي، جيڪو وڏي مقدار ۾ گرمي پيدا ڪري ٿو.ڪڏهن ڪڏهن، چونڊيل بفر ڪنسنٽريشن کي مناسب سمجهي سگهجي ٿو.جڏهن ته، ماحولياتي گرمي پد ۾ واڌ جي حالتن ۾ يا جڏهن وڌيڪ وولٽيج استعمال ڪندي، گرميءَ جي ڪري پاڻيءَ جو بخارات تيز ٿي سگهي ٿو، جنهن جي نتيجي ۾ بفر جي حد کان وڌيڪ مقدار پيدا ٿي سگهي ٿي ۽ ان جي نتيجي ۾ جھلي سڪي وڃي ٿي.
نموني حجم
cellulose acetate membrane electrophoresis ۾، نموني جي مقدار جو اندازو مختلف عنصرن سان ڪيو ويندو آهي، جنهن ۾ اليڪٽرروفورسس جون حالتون، نموني جا خاصيتون، داغ لڳائڻ جا طريقا، ۽ ڳولڻ جا طريقا شامل آهن.عام اصول جي طور تي، وڌيڪ حساس طريقي سان ڳولڻ جو طريقو، ننڍڙو نمونو حجم ٿي سگهي ٿو، جيڪو الڳ ڪرڻ لاء فائدي وارو آهي.جيڪڏهن نموني جو مقدار تمام گهڻو آهي، اليڪٽرروفورٽيڪڪ علحدگيء جا نمونا واضح نه هوندا، ۽ داغ پڻ وقت سازي ٿي سگهي ٿو.بهرحال، جڏهن مقداري طور تي جدا ٿيل داغ بينڊن جو تجزيو ڪيو وڃي ته ايليوشن رنگيميٽرڪ ڳولڻ جي طريقن کي استعمال ڪندي، نموني جي مقدار کي تمام ننڍو نه هجڻ گهرجي، ڇاڪاڻ ته اهو نتيجو ٿي سگهي ٿو گهٽ جذبي قدرن جي لاءِ ڪجهه حصن لاءِ، ان جي نتيجي ۾ انهن جي مواد کي ڳڻڻ ۾ اعليٰ غلطيون.اهڙين حالتن ۾، نموني جي مقدار کي مناسب طور تي وڌايو وڃي.
عام طور تي، نموني جي مقدار کي شامل ڪيو ويو نمونو ايپليڪيشن لائن جي هر سينٽي ميٽر تي 0.1 کان 5 μL تائين، 5 کان 1000 μg جي نموني جي مقدار جي برابر.مثال طور، معمولي سيرم پروٽين جي اليڪٽرروفورسس تجزيي ۾، ايپليڪيشن لائن جي هر سينٽي ميٽر تي شامل ڪيل نموني حجم عام طور تي 1 μL کان وڌيڪ نه هوندي آهي، 60 کان 80 μg پروٽين جي برابر.جڏهن ته، ساڳئي اليڪٽرروفورسس طريقو استعمال ڪندي لپپروٽين يا گليڪوپروٽين جو تجزيو ڪرڻ، نموني جي مقدار کي ساڳئي طرح وڌائڻ جي ضرورت آهي.
نتيجي ۾، سڀ کان وڌيڪ مناسب نموني جي مقدار کي منتخب ڪيو وڃي مخصوص حالتن جي بنياد تي ابتدائي تجربن جي هڪ سلسلي ذريعي.
داغ جي حل جو انتخاب
cellulose acetate membrane electrophoresis ۾ الڳ ٿيل بينڊ عام طور تي معلوم ٿيڻ کان اڳ داغ ٿيل آھن.مختلف نمونن جي اجزاء کي مختلف داغ ڏيڻ جي طريقن جي ضرورت هوندي آهي، ۽ سيلولوز ايڪٽيٽ جھلي الیکٹروفورسس لاءِ مناسب داغدار طريقا فلٽر پيپر تي مڪمل طور تي لاڳو نه هوندا.
اسٽيننگ حل چونڊڻ لاء ٽي اهم اصول آهنcellulose acetate جھلي.پهرين،پاڻي ۾ حل ٿيندڙ رنگن کي الڪوحل ۾ حل ٿيندڙ رنگن جي ڀيٽ ۾ ترجيح ڏني وڃي ته جيئن جھلي جي ڇڪڻ ۽ ان جي خراب ٿيڻ کان بچڻ لاءِ داغدار حل جي ڪري.داغ ٿيڻ کان پوء، اهو ضروري آهي ته جھلي کي پاڻي سان ڌوء ۽ داغ جي مدت کي گھٽايو وڃي.ٻي صورت ۾، جھلي ڳاڙھو يا سڪي ٿي سگھي ٿو، جيڪو بعد ۾ ڳولڻ تي اثر انداز ڪندو.
ٻيو، اهو بهتر آهي ته رنگن کي چونڊڻ لاء مضبوط داغ سان تعلق رکندڙ نموني لاء.سيرم پروٽينن جي سيلولوز ايڪٽيٽ جھلي الیکٹروفورسس ۾، امينو ڪارو 10B عام طور تي استعمال ڪيو ويندو آهي ڇاڪاڻ ته مختلف سيرم پروٽين جي اجزاء ۽ ان جي استحڪام لاء ان جي مضبوط داغ لاڳاپي جي ڪري.
ٽيون، قابل اعتماد معيار رنگن کي چونڊيو وڃي.ڪجهه رنگ، ساڳئي نالي جي باوجود، شايد نجاست تي مشتمل هجن، جن جي نتيجي ۾ داغ لڳڻ کان پوءِ خاص طور تي اونداهي پس منظر ٿئي ٿو.اهو اصل ۾ چڱي طرح الڳ ٿيل بئنڊ کي به ڦٽو ڪري سگهي ٿو، انهن کي فرق ڪرڻ ڏکيو بڻائي ٿو.
آخر ۾، staining حل ڪنسنٽريشن جو انتخاب اهم آهي.نظرياتي طور تي، اهو لڳي سگهي ٿو ته هڪ اعلي داغدار حل جي تسلسل نموني جي اجزاء جي وڌيڪ مڪمل داغ ۽ بهتر داغ جي نتيجن کي ڏسندي.بهرحال، اهو معاملو ناهي.نموني جي اجزاء ۽ رنگ جي وچ ۾ پابند لاڳاپو هڪ خاص حد آهي، جيڪا داغ جي حل جي ڪنسنٽريشن ۾ اضافو سان نه وڌندي آهي.ان جي برعڪس، هڪ تمام گهڻي داغدار حل جو ڪنسنٽريشن نه رڳو رنگ کي ضايع ڪري ٿو پر ان کي صاف پس منظر حاصل ڪرڻ ڏکيو به بڻائي ٿو.ان کان علاوه، جڏهن رنگ جي شدت هڪ خاص حد تائين پهچندي آهي، رنگ جي جذب وکر هڪ لڪير واري رشتي جي پيروي نه ڪندو آهي، خاص طور تي مقدار جي ماپ ۾. سيلولوز ايڪٽيٽ جھلي الیکٹروفورسس ۾، داغ جي حل جو ڪنسنٽريشن عام طور تي پيپر اليڪٽرروفورسس ۾ استعمال ٿيل کان گهٽ هوندو آهي.
Beijing Liuyi Biotechnology بابت ڄاڻڻ لاءِ تفصيل's cellulose acetate جھليelectrophoresis ٽينڪ ۽ ان جي electrophoresis درخواست، مهرباني ڪري هتي وڃو:
لCellulose Acetate Membrane ذريعي سيرم پروٽين کي الڳ ڪرڻ جو تجربو
لCellulose Acetate Membrane Electrophoresis
لCellulose Acetate Membrane Electrophoresis (1) استعمال ڪندي ڪيترن ئي خيالن کي ذهن ۾ رکڻ گهرجي.
جيڪڏهن توهان وٽ اسان جي شين جي خريداري جو منصوبو آهي، مهرباني ڪري اسان سان رابطو ڪرڻ ۾ سنکوڪ نه ڪريو.توهان اسان کي اي ميل تي پيغام موڪلي سگهو ٿا[اي ميل محفوظ]يا[اي ميل محفوظ]، يا مهرباني ڪري اسان کي +86 15810650221 تي ڪال ڪريو يا Whatsapp + 86 15810650221 شامل ڪريو، يا Wechat: 15810650221.
حوالو:Electrophoresis (ٻيو ايڊيشن) پاران مسٽر لي
پوسٽ ٽائيم: جون-06-2023